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組織固定液固定時間對切片質(zhì)量影響重大
在醫(yī)學(xué)病理診斷中，組織固定是切片制作的關(guān)鍵步驟之一，而固定時間的把控更是至關(guān)重要。近日，一項關(guān)于組織固定液固定時間對切片影響的研究揭示了固定時間過長或過短對切片質(zhì)量的深遠(yuǎn)影響，為病理診斷的準(zhǔn)確性提供了新的科學(xué)依據(jù)。
組織固定是病理切片制作的首要環(huán)節(jié)，旨在通過化學(xué)固定劑的作用，使組織細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，從而保持細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，為后續(xù)的切片和染色步驟奠定基礎(chǔ)。然而，固定時間的把控卻是一門學(xué)問。固定時間過長或過短，都可能對切片質(zhì)量產(chǎn)生不利影響。
當(dāng)組織固定液固定時間過長時，會導(dǎo)致組織過度交聯(lián)。這不僅會使組織變硬，增加切片時的難度，還可能導(dǎo)致切片質(zhì)量下降，產(chǎn)生碎片。更重要的是，過度交聯(lián)會掩蓋抗原表位，降低抗原的可及性，從而影響免疫組化染色的效果。對于核酸來說，過度固定會增加提取難度，損傷程度，降低質(zhì)量，進(jìn)而影響基因分析實驗，如降低PCR擴(kuò)增效率，使測序結(jié)果不準(zhǔn)確。因此，長時間固定雖然看似能夠確保組織結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，但實際上卻可能失去了切片質(zhì)量和后續(xù)檢測的準(zhǔn)確性。
相反，如果組織固定液固定時間過短，組織可能無法完全固定，導(dǎo)致組織自溶、細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，影響細(xì)胞形態(tài)觀察。在免疫組化檢測中，抗原易丟失或變性，從而影響檢測結(jié)果。此外，固定不足還會使核酸酶不能有效抑制，核酸易被降解，導(dǎo)致核酸量減少、質(zhì)量下降，影響分子生物學(xué)檢測。因此，短時間固定雖然能夠節(jié)省時間，但卻可能因固定不充分而導(dǎo)致切片質(zhì)量低下，甚至影響診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。
那么，如何確定合適的固定時間呢？這需要根據(jù)組織的類型、大小、厚度以及所使用的固定液種類等因素來綜合考慮。一般來說，大多數(shù)組織在10％中性緩沖福爾馬林中應(yīng)固定6~24小時。然而，固定的時間并非一成不變，它受到多種因素的影響，如固定液的溫度、組織的含水量等。因此，在實際操作中，病理技術(shù)人員需要根據(jù)具體情況靈活調(diào)整固定時間，以獲得很好的固定效果。
組織固定液固定時間對切片質(zhì)量具有重大影響。過長或過短的固定時間都可能對切片質(zhì)量和后續(xù)檢測產(chǎn)生不利影響。因此，在病理切片制作過程中，需要嚴(yán)格把控固定時間，確保切片質(zhì)量和診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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