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        用于高分辨率生物打印的新型(PNIPAAm)基雙凝膠墨水

        來源: 發(fā)布時間:2025-06-20

        本文介紹了一種用于高分辨率生物打印的新型聚 N - 異丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)基雙凝膠墨水和熱可逆泊洛沙姆支撐浴系統(tǒng)。該墨水通過快速熱凝膠化和自發(fā)共價交聯(lián)反應,結合支撐浴在水合加熱環(huán)境中維持結構,可產(chǎn)生直徑 80-200μm 的均勻纖維多層結構。研究通過流變學分析、打印實驗和細胞兼容性測試,闡明了打印因素間的關系,證明了該系統(tǒng)在無細胞和細胞負載支架高分辨率打印中的能力,為擠壓基生物墨水與支撐浴的打印研究提供了新方向。

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        一、研究背景與目的1. 擠壓生物打印的挑戰(zhàn):傳統(tǒng)擠壓打印因墨水高粘度(10s-1000s Pa?s)限制噴嘴尺寸,難以實現(xiàn)百微米以下分辨率。

        2. 創(chuàng)新解決方案:開發(fā) PNIPAAm 基雙凝膠墨水與泊洛沙姆支撐浴系統(tǒng),利用熱凝膠化和共價交聯(lián),結合支撐浴維持結構,提升打印分辨率。二、材料設計與制備1. 熱凝膠大分子(TGM)合成

        1. 組成:NIPAAm(86.5 mol%)、GMA(7.5 mol%)、DBA(3.5 mol%)、AA(2.5 mol%),AIBN 引發(fā)劑。

        2. 特性:LCST onset 19.9±0.7℃,peak 25.5±1.0℃,分子量 Mn=19849 Da,PDI=2.76。

        2. 交聯(lián)劑(PAMAM)合成:MBA 與哌嗪(3:4 molar ratio)反應,Mn=1776 Da。

        3. 墨水與支撐浴制備

        1. 墨水:TGM 與 PAMAM 按 4:3 質(zhì)量比混合,濃度 17.5%-35% w/v。

        2. ?。翰绰迳衬?F-108 溶于水,濃度 25%-35% w/v。三、關鍵實驗方法1. 流變學分析

        1. 粘度:TGM 墨水 < 1 Pa?s(12.5℃),浴在 37℃具剪切稀化特性。

        2. 模量:浴 G' 為 7.5-17 kPa(25%-35% 濃度),yield stress 57.4-174.6 Pa。

        2. 打印實驗

        1. 設備:Cellink BIO X 3D 打印機,噴嘴 25G-32G。

        2. 條件:墨水 12.5℃,浴 37℃,打印壓力 5-35 kPa。

        3. 評估:纖維直徑、孔隙 Pr score、形狀 / 面積均勻性。

        3. 細胞兼容性

        1. leachables assay:L929 細胞 viability>80%(1X-100X 稀釋)。

        2.打印 viability:26.25% 墨水組 3 h viability 43.6±3.2%,24 h 42.3±1.4%。

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        四、主要結果


        2. 材料優(yōu)勢:雙凝膠機制結合泊洛沙姆浴,兼顧結構穩(wěn)定性與細胞兼容性。

        3. 應用前景:為骨軟骨組織工程提供高分辨率支架,推動熱凝膠材料在生物打印中的應用。


        關鍵問題

        1. 該研究中雙凝膠墨水的交聯(lián)機制是什么?

        答案:雙凝膠墨水基于 PNIPAAm 的熱凝膠化和 PAMAM 交聯(lián)劑的共價交聯(lián)。PNIPAAm 在高于 LCST(25.5℃)時快速熱凝膠化,形成物理網(wǎng)絡;同時,PAMAM 與 TGM 中的 GMA 環(huán)氧基團發(fā)生胺 - 環(huán)氧反應,形成共價交聯(lián)網(wǎng)絡,增強機械性能并防*脫水收縮。

        2. 泊洛沙姆支撐浴在打印中的關鍵作用是什么?

        答案:泊洛沙姆支撐浴在 37℃形成凝膠,為低粘度墨水提供機械支撐,維持擠出纖維的形狀 fidelity。浴具高儲能模量(7.5-17 kPa)和 yield stress(57.4-174.6 Pa),可自愈合并傳導熱量,確保墨水快速熱凝膠化,同時維持水合環(huán)境適合細胞培養(yǎng)。

        3. 該系統(tǒng)實現(xiàn)的打印分辨率如何,細胞兼容性表現(xiàn)怎樣?

        答案:打印分辨率可達纖維直徑 80-200 μm,孔隙形狀均勻性 > 0.8。細胞兼容性方面,leachables 無毒性,打印后 3 h 和 24 h 細胞 viability 約 43%,表明系統(tǒng)可用于細胞負載支架打印,雖 viability 有待提升,但證明了可行性。


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