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YuanStem 8多能干細(xì)胞培養(yǎng)基
YuanStem 8多能干細(xì)胞培養(yǎng)基是一種無(wú)動(dòng)物源成份、化學(xué)成分明確的多能干細(xì)胞（PSC）培養(yǎng)基，專(zhuān)為人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）及胚胎干細(xì)胞（ESC）設(shè)計(jì)，無(wú)需飼養(yǎng)層。其突破性熱穩(wěn)定配方支持 Weekend-Free 培養(yǎng)方案（隔日補(bǔ)液），在維持細(xì)胞干性與遺傳穩(wěn)定性的同時(shí)，***簡(jiǎn)化操作流程。
該產(chǎn)品采用 50:1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基-添加物雙組分體系（490ml+10ml），可無(wú)縫兼容 Matrigel®、VTN-N 等基質(zhì)材料，與常用培養(yǎng)體系如E8體系、mTeSR體系等無(wú)縫切換。
優(yōu)勢(shì)
1. ***的干性維持能力：較好維持細(xì)胞狀態(tài)、干性，及遺傳信息穩(wěn)定性；
2. 靈活培養(yǎng)方案支持：優(yōu)化配方及熱穩(wěn)定組分，支持隔天換液及weekend-free換液；
3. ***包被兼容性：兼容常用包被體系，如基質(zhì)膠（Matrigel）、玻連蛋白（VTN-N）等；
4. 培養(yǎng)體系無(wú)縫切換：與常用培養(yǎng)體系無(wú)縫切換，如E8/E8 Flex、mTeSR/mTeSR Plus等。
數(shù)據(jù)展示
1. 干性檢測(cè)
圖1顯示，PBMC來(lái)源的iPSC在YuanStem 8培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)15代后，SOX2、OCT4、SSEA4、Nanog及TRA-1-60等多能性標(biāo)志物均維持高表達(dá)。
2. 核型檢測(cè)
圖2顯示，PBMC來(lái)源的iPSC在YuanStem 8培養(yǎng)基中經(jīng)連續(xù)15代單細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，核型維持正常，未發(fā)生異常。
3. 細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)
3.1 Matrigel包被條件下的培養(yǎng)性能
圖3顯示，PBMC來(lái)源iPSC在Matrigel（Corning #354230）包被的基底上培養(yǎng)時(shí)，YuanStem 8培養(yǎng)體系中的細(xì)胞增殖速率與mTeSR Plus體系相近（倍增時(shí)間差異<10%），且兩種體系均有效維持細(xì)胞未分化狀態(tài)。
3.2 VTN-N包被條件下的培養(yǎng)性能
圖4顯示，PBMC來(lái)源iPSC在VTN-N（Thermo #A31804）包被基底中，YuanStem 8培養(yǎng)體系的細(xì)胞增殖速率較mTeSR Plus體系降低約20%（P<0.05），但兩種體系下的細(xì)胞仍保持典型的克隆形態(tài)與未分化狀態(tài)。
3.3 iPSC生長(zhǎng)曲線(xiàn)
圖5所示，PBMC重編程來(lái)源的iPSC細(xì)胞，分別在VTN-N*（Thermo#A31804）和Matrigel*（Corning#354230）兩種細(xì)胞基質(zhì)包被的TC處理的6孔板，用YuanStem 8多能干細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)，初始細(xì)胞接種總量分別是15萬(wàn)/孔及25萬(wàn)/孔，分別在第1/3/5天換液?？梢钥闯觯琈atrigel包被組iPSC細(xì)胞生長(zhǎng)更快，但**終收獲細(xì)胞量比VTN包被組少（約300萬(wàn) vs 約400萬(wàn)）**。
* Matrigel是當(dāng)前科研中培養(yǎng)多能干細(xì)胞*常用的水凝膠，其與E8體系共用是當(dāng)前許多分化方法與類(lèi)***構(gòu)建的起始條件；VTN是無(wú)動(dòng)物源成分的重組蛋白，適合需要嚴(yán)格控制原料組分的實(shí)驗(yàn)，但由于其成分單一，細(xì)胞貼附相對(duì)沒(méi)有Matrigel等基質(zhì)膠類(lèi)型的包被材料緊密，對(duì)使用者的操作和經(jīng)驗(yàn)有一定的要求。
**實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在Matrigel包被的6孔板中，mTeSR Plus和E8 Flex培養(yǎng)iPSC的總細(xì)胞量分別約400萬(wàn)和約300萬(wàn)。
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