在細(xì)胞實驗中，通過原代分離實驗得到的原代細(xì)胞，與永生化的細(xì)胞系相比，能夠忠實模擬體內(nèi)生理狀態(tài)和功能，屬于“高階”的細(xì)胞模型，但是獲得高純度的原代細(xì)胞是一個非常艱巨的過程，科學(xué)合理的原代細(xì)胞提取和培養(yǎng)方法對于任何實驗室都是一筆不可多得的財富。上次小編整理了脂肪原代細(xì)胞提取的教程，得到了大家的一致好評。應(yīng)廣大讀者要求，小編快馬加鞭“肝”出了小鼠原代肝細(xì)胞的提取“密鑰”，趕緊收好~肝臟是人體“”代謝，在包括葡萄糖、蛋白質(zhì)和脂肪等多種物質(zhì)代謝過程中發(fā)揮重要作用。肝臟參與多種生理病理過程，與、、糖尿病等代謝性疾病密切相關(guān)。肝臟中的細(xì)胞主要分為實質(zhì)細(xì)胞和非實質(zhì)細(xì)胞兩類：實質(zhì)細(xì)胞的占比達(dá)到整個肝臟的70%-80%，包括肝細(xì)胞和少量的膽管內(nèi)皮細(xì)胞；非實質(zhì)細(xì)胞包括星狀細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，NK細(xì)胞，成纖維細(xì)胞等。肝原代細(xì)胞提取培養(yǎng)的主要是肝細(xì)胞。 原代肝細(xì)胞的定制尺寸。歡迎來電咨詢上海中喬新舟！內(nèi)蒙古比格犬原代肝細(xì)胞種類

原代肝細(xì)胞屬于高度分化的細(xì)胞，對體外培養(yǎng)條件的要求比傳代細(xì)胞高，其在體外存活時間也比傳代細(xì)胞短，采用單層膠原培養(yǎng)法進(jìn)行體外培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞存活時間為1周左右[25]。本實驗是在Seglen兩步灌流法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，結(jié)合逆向灌流、多次低速離心等方法成功分離獲取活率高、純度高的原代肝細(xì)胞，且體外存活時間可達(dá)1周，與文獻(xiàn)[25]報道一致。體外培養(yǎng)48h后給予不同濃度的FFA混合物(油酸∶棕櫚酸=2∶1)進(jìn)行誘導(dǎo)，誘導(dǎo)24h后油紅O染色顯示肝細(xì)胞內(nèi)有脂滴沉積，肝細(xì)胞內(nèi)TG含量增加，且隨著FFA濃度升高而增加，成功構(gòu)建了肝脂肪變性細(xì)胞模型。本方法操作簡單、時間短、成功率高，因此具有廣泛應(yīng)用價值。內(nèi)蒙古比格犬原代肝細(xì)胞種類上海中喬新舟 原代肝細(xì)胞值得推薦。歡迎來電咨詢上海中喬新舟！

    肝臟原位灌注法：（為分離肝細(xì)胞的經(jīng)典方法）1，在38度-39度的水浴槽中預(yù)熱hepes緩沖液和膠原酶液，使其在肝內(nèi)達(dá)到37度。2，給大鼠（180-200g）腹腔注射巴比妥鈉100ul/100g，從古靜脈注射肝素1000u，打開腹腔，在門靜脈的肝外5mm處松松的放一個結(jié)扎線環(huán)，將血管套管插入至肝掌，結(jié)扎，快速切開肝下血管與面壓力過高，關(guān)注500ml無鈣hepes緩沖液，流速為30ml/min，數(shù)秒鐘肝臟即變白。3，灌注300ml膠原酶液，流速15ml/min，持續(xù)20min。肝臟腫大。4，切下肝臟。用hepes緩沖液沖洗。切開肝纖維囊，收集消化清洗液被并混入100mlleibovitzL15培養(yǎng)液，該懸液含大量肝細(xì)胞。5，用兩層紗布或60-80um尼龍篩過濾細(xì)胞懸液，靜置，使活細(xì)胞沉降20分，室溫下，去除含組織碎屑和死細(xì)胞的上清液。6，低速離心法清洗細(xì)胞50g40s三次以去除膠原酶，破壞的細(xì)胞以及肺肝實質(zhì)來源的細(xì)胞。7，將細(xì)胞收集在培養(yǎng)液F12中（含，10ug/ml牛胰島素，），co2孵箱內(nèi)培養(yǎng)。8，傳代培養(yǎng)：細(xì)胞長滿時，先用BSS洗1-2次，再用1：1的，吸除消化液，輕輕洗細(xì)胞層，加適量培養(yǎng)液，用吸管吹打成細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)。通常從一個大鼠肝中可獲得4*10‘6-6*10’6個活細(xì)胞。

原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基由補(bǔ)充了適當(dāng)?shù)纳L因子和細(xì)胞因子的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組成。細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)箱中生長并維持在適當(dāng)?shù)臏囟群突旌蠚怏w中（對于哺乳動物細(xì)胞，通常為37°C，5％CO2）。培養(yǎng)條件根據(jù)細(xì)胞類型而廣變化。生長培養(yǎng)基的pH，葡萄糖濃度，生長因子和其他營養(yǎng)物質(zhì)的存在可能會有所不同，具體取決于細(xì)胞類型。在建立原代培養(yǎng)過程中，必須在生長培養(yǎng)基中加入以抑制從宿主組織引入的污染?？赡馨☉c大霉素，青霉素，鏈霉素和兩性霉素B的混合物。但是，不建議長期使用，因為某些試劑（例如兩性霉素B）從長期來看可能對細(xì)胞有毒。 上海中喬新舟告訴您 原代肝細(xì)胞的選擇方法。歡迎來電咨詢上海中喬新舟！

    生物醫(yī)學(xué)實驗中常常會用到細(xì)胞系，因為它們可以快速生長和擴(kuò)增提供實驗分析要用到的細(xì)胞。細(xì)胞系與新分離的或原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件相類似，但也有一些基本不同的地方：（1）每個細(xì)胞系需要其特定的生長因子混合物。（2）與原代細(xì)胞相比，它們的生長需要更嚴(yán)密的監(jiān)測，因為使它們無限生長的突變同時也會造成它們很快達(dá)到過度生長。因此，當(dāng)細(xì)胞系生長到了幾乎覆蓋整個培養(yǎng)器皿底部，也就是90%的密度時，細(xì)胞需要重懸洗滌用于實驗或凍存以備將來使用，或者重新接種到新的培養(yǎng)器皿進(jìn)一步擴(kuò)增。細(xì)胞傳代或續(xù)代培養(yǎng)是將細(xì)胞從現(xiàn)有的培養(yǎng)物分開或分出來開始新的培養(yǎng)，并加入新鮮培養(yǎng)液來促進(jìn)擴(kuò)增的常用手段。盡管它的概念本身相對簡單，本短片中我們將討論能成功保存和擴(kuò)增細(xì)胞系的一些更重要的步驟。 原代肝細(xì)胞哪個性價比高？上海中喬新舟告訴您。貴州小鼠心肌原代肝細(xì)胞特點

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肝臟表面有一薄層致密的結(jié)締組織構(gòu)成的被膜。被膜深入肝內(nèi)形成網(wǎng)狀支架，將肝實質(zhì)分隔為許多具有相似形態(tài)和相同功能的基本單位，稱為肝小葉。人類肝臟約有50萬個肝小葉。肝小葉呈多角棱柱體，約l毫米×2毫米大小，小葉的中軸貫穿一條靜脈，為靜脈。肝細(xì)胞以靜脈為中心呈放射狀排列，形成肝細(xì)胞索。肝細(xì)胞索相互吻合成網(wǎng)，網(wǎng)眼間有竇狀隙和血竇。肝細(xì)胞間的管狀間隙形成毛細(xì)膽管。因此可以說，肝小葉是由肝細(xì)胞、毛細(xì)膽管、血竇和相當(dāng)于毛細(xì)淋巴管的竇周隙(狄氏間隙)所組成。內(nèi)蒙古比格犬原代肝細(xì)胞種類

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1、原代細(xì)胞：ScienCell（中國區(qū)正規(guī)一級代理）人源和動物源各種原代細(xì)胞。

2、培養(yǎng)基：原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑：胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實驗檢測試劑盒、細(xì)胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。

4、細(xì)胞系（株）：種類豐富（1000余種），已通過STR鑒定；提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。

5、自研產(chǎn)品：支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。

6、技術(shù)服務(wù)：綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建，細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實驗。