原代肝細胞比較常用的模型是二維模型。在膠原包被的培養(yǎng)板上，原代肝細胞可貼壁培養(yǎng)，同樣高密度培養(yǎng)有助于肝細胞分化狀態(tài)的維持。但原代肝細胞在體外的培養(yǎng)時間較短，人原代肝細胞在體外培養(yǎng)3天內(nèi)可保持乙肝病毒易感性，培養(yǎng)兩周發(fā)生明顯的去分化以及細胞凋亡情況。北京大學(xué)鄧宏魁教授發(fā)表在《科學(xué)》上的數(shù)據(jù)顯示，通過添加5種小分子化合物抑制原代肝細胞去分化進程，可在體外長期維持肝細胞的分化狀態(tài)，維持時間長達八周。那為什么原代肝細胞在體外容易去分化呢？肝細胞在體外缺乏了肝細胞與肝非實質(zhì)細胞的交流，又或者缺乏了肝臟的三維結(jié)構(gòu)?；谝陨蠁栴}與分析，我在碩士期間開展了肝細胞與肝非實質(zhì)細胞的共培養(yǎng)工作。結(jié)果顯示，通過共培養(yǎng)，原代肝細胞可在體外長期培養(yǎng)，并在鋪板后的72天內(nèi)仍然保持了乙肝病毒的易感性，說明缺乏細胞間交流是原代肝細胞發(fā)生去分化的原因之一。到目前為止，原代肝細胞體外維持四個月的時間記錄仍然沒有被打破。 立沃生物的原代肝細胞的分離技術(shù)門檻很高，需要特定的實驗室條件和技術(shù)，以及嚴格的實驗室管理和質(zhì)量控制。湛江中國人原代肝細胞實驗

原代肝細胞是簡單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝臟細胞或是cancer細胞系，原代肝細胞在造模的同時不需要復(fù)雜的對細胞進行重編程，以及誘導(dǎo)分化，可以更方便更快速的進行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比，原代肝細胞能夠更準確的反應(yīng)體內(nèi)的真實情況，有數(shù)據(jù)表明，原代肝細胞比iPSC誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝細胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍，同時這些細胞還保留了捐獻者的特有特征，是較為理想的研究模型。另一個優(yōu)勢在于，原代肝細胞衍生的Organoid可以提供獨特的肝毒模型，因為原代細胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細胞不僅擁有捐贈者特有的生理特性，同時也具備其他兩種肝細胞在應(yīng)對病原體時的生理反應(yīng)。北京獼猴原代肝細胞培養(yǎng)立沃生物原代肝細胞提供多種細胞培養(yǎng)實驗合作服務(wù)，包括細胞培養(yǎng)實驗合作、細胞培養(yǎng)實驗項目合作等。

貓作也是原代肝細胞的常用供體，近年來在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的研究中扮演著越來越重要的角色。相對于小鼠和大鼠等試驗用動物，貓的體型更大，便于試驗操作和觀察，因此被廣泛應(yīng)用于科研、教育和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。據(jù)美國農(nóng)業(yè)部動植物衛(wèi)生檢疫局（APHIS）的統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，在2017年，美國就使用了約萬只貓進行試驗研究。而在中國，試驗用貓的年使用量也在不斷增加，據(jù)文獻報道，每年浙江省的藥品質(zhì)量監(jiān)測就需要使用400-500只試驗用貓。貓的原代肝細胞和肝微粒體是不可或缺的研究材料。通過對貓的肝細胞進行體外研究，可以更加準確地評估藥物的代謝和毒性，為藥物研發(fā)提供重要的參考依據(jù)。此外，貓的原代肝細胞還可以用于疾病模型的建立和藥物療效的評估，為ClinicalTreatment提供重要的支持。然而，試驗用貓的使用也引起了一些爭議。一些動物保護組織認為，試驗用貓的使用會對動物造成痛苦和傷害，應(yīng)該盡量減少或避免使用。因此，科研人員需要在確保研究質(zhì)量的前提下，盡可能地減少試驗用貓的使用，采用替代方法和技術(shù)，以保障動物福利和人類健康。

原代肝細胞在OOC中的應(yīng)用備受關(guān)注。隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，OOC技術(shù)已經(jīng)成為了研究人體組織和疾病的重要手段之一。 原代肝細胞是從人體肝臟中分離出來的細胞，具有天然的生理功能和代謝特性。在OOC中，將原代肝細胞培養(yǎng)在微型芯片上，可以模擬人體肝臟的生理環(huán)境，從而更加真實地反映肝臟的生理和病理過程。 利用原代肝細胞構(gòu)建的OOC可以用于研究肝臟疾病的發(fā)生機制、藥物代謝和毒性評價等方面。例如，研究人員可以將不同的藥物添加到OOC中，觀察原代肝細胞對藥物的代謝過程，從而預(yù)測藥物的療效和副作用。此外，還可以利用OOC評估化學(xué)物質(zhì)對肝臟的毒性，為藥物研發(fā)和毒性評價提供更加準確的數(shù)據(jù)。 原代肝細胞在OOC中的應(yīng)用為肝臟疾病研究和藥物研發(fā)提供了新的思路和方法，有望為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻。立沃生物同一批次的原代肝細胞具有高度的穩(wěn)定性和可重復(fù)性，可以為客戶提供穩(wěn)定的實驗結(jié)果。

原代肝細胞也被多方面應(yīng)用于嵌合體肝模型當中。通過將正常人原代肝細胞移植到患有嚴重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的肝特異uPA轉(zhuǎn)基因小鼠中，可以成功地構(gòu)建嵌合體肝。而轉(zhuǎn)基因小鼠的uPA表達能夠促使鼠肝細胞死亡，從而為人原代肝細胞的移植、重建和增殖提供了一個適宜的微環(huán)境。在這種重建的嵌合體肝內(nèi)，人肝細胞占據(jù)了大約75％的比例，并且能夠持續(xù)高水平地表達人血清蛋白。通過使用病人血清和病毒核酸影響這種嵌合體小鼠，研究人員發(fā)現(xiàn)在肝內(nèi)可以檢測到病毒的RNA。然而，病理觀察并未發(fā)現(xiàn)病毒影響所導(dǎo)致的細胞病變。這一發(fā)現(xiàn)為研究病毒影響的機制提供了新的途徑，并為開發(fā)解決病毒影響的新方法提供了新的思路。此外，這項研究還為研究肝細胞移植和重建提供了新的實驗?zāi)Ｐ汀Ｍㄟ^將人原代肝細胞移植到轉(zhuǎn)基因小鼠中，研究人員可以更好地研究原代肝細胞的生長、分化和功能，從而為克服肝病提供新的思路和方法。這項研究的結(jié)果具有重要的臨床意義，有望為克服肝病和病毒影響提供新的策略。原代肝細胞衍生的Organoid既能提供需要的擁肝毒模型，也能體現(xiàn)肝細胞在應(yīng)對病原體時的生理反應(yīng)和結(jié)構(gòu)變化。湛江雞原代肝細胞提取

立沃生物的原代肝細胞可提供不同狀態(tài)的細胞，如貼壁細胞、懸浮細胞等，滿足客戶各種使用場景的個性化需求。湛江中國人原代肝細胞實驗

如何提升原代肝細胞的活率一直是個很大的挑戰(zhàn)。由于原代肝細胞的特殊性質(zhì)，它們的活率和得率往往比一般細胞低，這給研究工作帶來了很大的挑戰(zhàn)。為了提高原代肝細胞的活率和得率，我們可以采取以下措施： 1.優(yōu)化細胞培養(yǎng)條件：原代肝細胞對培養(yǎng)條件非常敏感，因此我們需要針對不同的細胞類型和實驗?zāi)康?，?yōu)化培養(yǎng)條件，包括培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、CO2濃度等。 2.選擇合適的細胞來源：原代肝細胞可以從不同的來源獲得，如人體肝臟組織、動物肝臟組織等，我們需要根據(jù)實驗需要選擇合適的細胞來源。 3. 優(yōu)化細胞分離方法：原代肝細胞的分離方法也會影響細胞的活率和得率。我們可以采用不同的分離方法，如機械分離、酶消化等，選擇適合的方法來分離細胞。 4. 使用適當?shù)募毎囵B(yǎng)基：不同的細胞類型需要不同的培養(yǎng)基，我們需要根據(jù)實驗需要選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)基。同時，我們還可以添加一些生長因子和細胞因子來促進細胞的生長和增殖。 5. 保持細胞的穩(wěn)定性：定期更換培養(yǎng)基、避免過度培養(yǎng)等。 提高原代肝細胞的活率和得率需要我們綜合考慮多個因素，包括細胞培養(yǎng)條件、細胞來源、細胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。湛江中國人原代肝細胞實驗