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        深圳草魚原代肝細(xì)胞貼壁

        來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-12-19

        原代肝細(xì)胞可以用于乙肝病毒的對(duì)照試驗(yàn)。為探究不同類型肝細(xì)胞對(duì)乙型肝炎病毒(HBV)的影響,以及不同藥物和生物學(xué)處理對(duì)HBV的影響,可以選擇了人原代肝細(xì)胞(PHH)樹鼩原代肝細(xì)胞(PTH)、hNTCP穩(wěn)定表達(dá)豬肝細(xì)胞(PPH-hNTCP)和hNTCP穩(wěn)定表達(dá)liver cancer細(xì)胞系(Huh7D-hNTCP)作為研究對(duì)象。 采用HBV模型,將不同類型肝細(xì)胞融合HBV,并進(jìn)行藥物處理和生物學(xué)處理。藥物處理包括小分子化合物和中藥提取物等,生物學(xué)處理包括過表達(dá)、敲除siRNA和shRNA等。通過對(duì)處理后的細(xì)胞進(jìn)行評(píng)價(jià),可以了解不同藥物和生物學(xué)處理對(duì)HBV的影響。 這種研究方法的意義在于探究不同類型肝細(xì)胞對(duì)HBV的影響,為研究HBV的機(jī)制提供重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。同時(shí),本研究還可以為開發(fā)新型抗HBV藥物提供參考,為臨床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。立沃生物原代肝細(xì)胞可以用于肝臟疾病研究、藥物代謝和藥物毒性、篩選藥物和測(cè)試藥物的毒性等方面的研究。深圳草魚原代肝細(xì)胞貼壁

        原代肝細(xì)胞還廣泛應(yīng)用于構(gòu)建移植人肝組織的小鼠模型。為了研究肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制和開發(fā)新的解決方法,科學(xué)家們開發(fā)了小鼠模型來模擬人類肝臟疾病。其中,將人原代肝細(xì)胞移植于鼠可建立移植人肝組織的小鼠模型。這種模型可以用于研究肝炎、liver cancer、肝纖維化等肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制和治療方法。 常用的小鼠模型為HBV三聚體小鼠模型。該模型首先對(duì)BALB/c鼠進(jìn)行全身致命性照射以去除正常小鼠的免疫系統(tǒng),然后用SCID小鼠骨髓細(xì)胞進(jìn)行免疫重構(gòu),然后將已經(jīng)受HBV影響的人原代肝細(xì)胞移植到鼠肝內(nèi)。大約80%的鼠出現(xiàn)病毒血癥,這意味著該模型可以用于研究HBV的發(fā)病機(jī)制和克服方法。 盡管血漿中病毒滴度比較低,維持時(shí)間大約20d,但短期觀察抗病毒的療效仍是可行的。這意味著該模型可以用于評(píng)估新的抗病毒藥物的療效和安全性。此外,該模型還可以用于研究liver cancer的發(fā)病機(jī)制和解決方法,因?yàn)閘iver cancer通常與肝炎病毒有關(guān)。 移植人肝組織的小鼠模型是一種重要的實(shí)驗(yàn)工具,可以用于研究肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制和解決方法,幫助科學(xué)家們更好地理解肝臟疾病,并開發(fā)新的克服途徑。惠州原代肝細(xì)胞實(shí)驗(yàn)原代肝細(xì)胞不能傳代和長(zhǎng)期培養(yǎng),會(huì)丟失肝細(xì)胞分化特性與功能,通過誘導(dǎo)去分化做成肝祖細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)。

        解決人工肝臟合成難題,原代肝細(xì)胞是理想的肝細(xì)胞源。目前,常用的肝細(xì)胞源有人原代肝細(xì)胞、動(dòng)物原代肝細(xì)胞、liver cancer細(xì)胞系HepG2、HepaRG、永生化細(xì)胞以及干細(xì)胞等。其中,人原代肝細(xì)胞是理想的肝細(xì)胞源,因?yàn)樗鼈兙哂型暾母喂δ芎蜕硖匦?,能夠更好地模擬人體肝臟的生理狀態(tài)。但是,由于人原代肝細(xì)胞的獲取和保存非常困難,且存在批次差異和有限的增殖能力,因此在實(shí)際應(yīng)用中受到了一定的限制。 相比之下,動(dòng)物原代肝細(xì)胞則具有更好的增殖能力和更便捷的獲取方式,但是由于動(dòng)物肝臟與人肝存在一定的差異,因此其在模擬人體肝臟生理狀態(tài)方面存在一定的局限性。HepG2和HepaRG則是常用的liver cancer細(xì)胞系,它們具有較好的增殖能力和穩(wěn)定性,但是存在致瘤風(fēng)險(xiǎn),因此在臨床應(yīng)用中需要謹(jǐn)慎使用。 永生化細(xì)胞則是通過基因工程技術(shù)將原代肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化為無限增殖的細(xì)胞系,如HepG2.2.15和Huh7等。這些細(xì)胞系具有較好的增殖能力和穩(wěn)定性,但是存在一定的局限性和風(fēng)險(xiǎn)。 綜上所述,原代肝細(xì)胞是理想的肝細(xì)胞源,選擇合適的肝細(xì)胞源需要綜合考慮其功能、增殖能力、安全性等因素,以期達(dá)到想要的生物人工肝效果。

        不同物種的原代肝細(xì)胞在貼壁時(shí)間上存在差異。以小鼠為例,其原代肝細(xì)胞可能在培養(yǎng)基中需1個(gè)小時(shí)開始貼壁,而其他物種則需要4-6小時(shí)左右。這是由于不同物種的細(xì)胞形態(tài)、生理特性和培養(yǎng)條件等因素的影響。 在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),貼壁時(shí)間是一個(gè)重要的指標(biāo)。一般來說,原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)基中貼壁后,細(xì)胞的代謝活性和功能會(huì)得到提高,因此貼壁時(shí)間越短,細(xì)胞的生物學(xué)活性就越高。但是,如果貼壁時(shí)間過短,細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)脫落或死亡等情況,因此需要根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整。 另外,原代肝細(xì)胞的貼壁能力也與細(xì)胞的新鮮程度有關(guān)。新鮮分離的原代肝細(xì)胞一般需要4-6小時(shí)才能貼壁,而經(jīng)過冷凍保存的細(xì)胞則需要更長(zhǎng)的時(shí)間。因此,在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要根據(jù)細(xì)胞的新鮮程度和貼壁時(shí)間進(jìn)行合理的調(diào)整。 需要注意的是,幾乎所有物種的原代肝細(xì)胞都可以貼壁,但不同物種的細(xì)胞在培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基配方等方面存在差異。因此,在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要根據(jù)具體物種和實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行合理的選擇和調(diào)整,以確保細(xì)胞的生物學(xué)活性和代謝功能得到有效的發(fā)揮。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有多種細(xì)胞培養(yǎng)試劑,包括細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞因子等,為后續(xù)研究保駕護(hù)航。

        原代肝細(xì)胞可以分為貼壁原代肝細(xì)胞和懸浮原代肝細(xì)胞兩種類型。貼壁原代肝細(xì)胞是指在培養(yǎng)皿中貼附在表面上的肝細(xì)胞,而懸浮原代肝細(xì)胞則是指在培養(yǎng)液中懸浮的肝細(xì)胞。 由于原代肝細(xì)胞的特殊性質(zhì),它們?cè)诶鋬鰪?fù)蘇后容易出現(xiàn)失巢凋亡的現(xiàn)象。因此,如果要將肝細(xì)胞用于懸浮培養(yǎng),一般只能存活6小時(shí)左右,適合用于短期研究。而貼壁原代肝細(xì)胞則可以存活培養(yǎng)達(dá)15天,適合長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)研究觀察。 貼壁原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)需要一定的技術(shù)和條件。首先,需要選擇適合的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,以保證肝細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和分化。其次,需要注意細(xì)胞的密度和培養(yǎng)皿的大小,以避免細(xì)胞過度生長(zhǎng)或過度擁擠。此外,還需要注意細(xì)胞的純度和穩(wěn)定性,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。 原代肝細(xì)胞對(duì)于研究肝臟疾病和藥物代謝等方面具有重要的意義。通過對(duì)肝細(xì)胞的培養(yǎng)和研究,可以更好地理解肝臟的生理和病理過程,為肝臟疾病的診斷和預(yù)防提供更有效的方法和手段。立沃生物的原代肝細(xì)胞的分離技術(shù)門檻很高,需要特定的實(shí)驗(yàn)室條件和技術(shù),嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理和質(zhì)量控制。北京比格犬原代肝細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

        原代肝細(xì)胞作為體外藥物代謝研究的“金標(biāo)準(zhǔn)”,在藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究中具有重要的意義。深圳草魚原代肝細(xì)胞貼壁

        貼壁原代肝細(xì)胞是一種非常重要的實(shí)驗(yàn)材料,常用于酶誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇處理,使其恢復(fù)到正常狀態(tài)。復(fù)蘇后,需要使用鋪板培養(yǎng)基進(jìn)行懸浮,調(diào)整細(xì)胞濃度,然后使用膠原包被板進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況下,細(xì)胞可以在4~6小時(shí)內(nèi)貼壁。在原代肝細(xì)胞細(xì)胞貼壁后,需要更換維持培養(yǎng)基,繼續(xù)維持18小時(shí),以保證細(xì)胞狀態(tài)能夠盡可能地恢復(fù)。一旦原代肝細(xì)胞細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)良好,就可以開始進(jìn)行酶誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)了。通過檢測(cè)代謝活性和mRNA誘導(dǎo)水平,可以了解原代肝細(xì)胞細(xì)胞的生理狀態(tài)和功能。整個(gè)周期來看,原代肝細(xì)胞細(xì)胞貼壁后可以維持6~7天的狀態(tài)。但是隨著時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞貼壁狀態(tài)會(huì)變差,細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)脫落懸浮現(xiàn)象。因此,在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),需要注意原代肝細(xì)胞細(xì)胞的狀態(tài)和質(zhì)量,及時(shí)更換培養(yǎng)基,保持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和功能。同時(shí),也需要注意實(shí)驗(yàn)條件的控制,避免對(duì)原代肝細(xì)胞細(xì)胞造成不良影響。通過科學(xué)合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作,可以獲得準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為研究原代肝細(xì)胞細(xì)胞生理和病理提供重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。深圳草魚原代肝細(xì)胞貼壁