掃描電子顯微技術(shù)的應(yīng)用能從微納米尺度分析外科植入物的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成,解析細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)以及病毒結(jié)構(gòu)形態(tài),是外科植入、病理分析等不可或缺的研究手段。 掃描電鏡結(jié)合能譜儀不*能得到樣品的結(jié)構(gòu)與形貌圖,還能在微納米尺度下進(jìn)行三維重構(gòu),并能給出相...
自20世紀(jì)30年代電子顯微鏡面世以來,掃描電鏡(SEM)已成為眾多不同研究領(lǐng)域中的一個(gè)關(guān)鍵工具,范圍覆蓋從材料科學(xué)、到法醫(yī)學(xué)、工業(yè)生產(chǎn)甚至生命科學(xué)領(lǐng)域所涉及的一切內(nèi)容。 只要需要關(guān)于樣品表面或近表面區(qū)域的形貌、成分和結(jié)構(gòu)信息,掃描電鏡就會(huì)成為必要的工具。 ...
在材料領(lǐng)域中,掃描電鏡技術(shù)發(fā)揮著極其重要的作用,被普遍應(yīng)用于各種材料的形態(tài)結(jié)構(gòu)、界面狀況、損傷機(jī)制及材料性能預(yù)測(cè)等方面的研究。利用掃描電鏡可以直接研究晶體缺陷及其產(chǎn)生過程,可以觀察金屬材料內(nèi)部原子的集結(jié)方式和它們的真實(shí)邊界,也可以觀察在不同條件下邊界移動(dòng)的方式...
掃描電鏡進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。在掃描電子顯微鏡中,成象的信息主要是電子信息。根據(jù)近代的電子工業(yè)技術(shù)水平,即使高速變化的電子信息,也能毫不困難的及時(shí)接收、處理和儲(chǔ)存,故可進(jìn)行一些動(dòng)態(tài)過程的觀察。如果在樣品室內(nèi)裝有加熱、冷卻、彎曲、拉伸和離子刻蝕等附件,則可以通過電視裝置...
掃描電鏡以觀察樣品的表面形態(tài)為主。掃描電鏡樣品的制備,必須滿足以下要求: ①保持完好的組織和細(xì)胞形態(tài); ?、诔浞直┞队^察的部位; ?、哿己玫膶?dǎo)電性和較高的二次電子產(chǎn)額; ?、鼙3殖浞指稍锏臓顟B(tài)。 某些含水量低且不易變形的生物材料,可以...
掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope,SEM)是一種用于高分辨率微區(qū)形貌分析的大型精密儀器。具有景深大、分辨率高,成像直觀、立體感強(qiáng)、放大倍數(shù)范圍寬以及待測(cè)樣品可在三維空間內(nèi)進(jìn)行旋轉(zhuǎn)和傾斜等特點(diǎn)。另外具有可測(cè)樣品種類豐富,幾...
外泌體在國家自然科學(xué)基金立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是**學(xué) ,近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在**的形成,耐藥性,檢測(cè)等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在Molecular Cancer (IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/...
外泌體中包含mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等多種RNA分子,不同類型細(xì)胞所分泌的外泌體包含的RNA分子不同,這些RNA分子以外泌體為載體進(jìn)入靶細(xì)胞后,會(huì)通過不同的機(jī)制對(duì)靶細(xì)胞產(chǎn)生影響。通過高通量測(cè)序技術(shù)分析外泌體RNA分子差異,是對(duì)外泌體R...
外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?,F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有:肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免...
外泌體的分離對(duì)于理解它們的作用機(jī)制和它們?cè)谏镝t(yī)學(xué)科學(xué)中的應(yīng)用是至關(guān)重要的。一些實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)成功地利用諸如超離心法、超濾法、層析法、基于聚合物的沉淀法和抗體偶聯(lián)磁珠的親和捕獲等技術(shù)分離外泌體。已有研究表明,密度梯度離心法可以分離出比較純凈的外泌體。1983年外泌...
外泌體是一類由細(xì)胞分泌的病毒大小的膜狀囊泡,它們攜帶有蛋白質(zhì)與核酸,調(diào)節(jié)著胞內(nèi)的溝通。目前較常用的外泌體提取方法是differential centrifugation (DC)——差速離心法。也有用試劑盒提取外泌體,但效率均不高。聚乙二醇(PEG)用于濃縮...
外泌體中發(fā)現(xiàn)了一種特定的內(nèi)泌體蛋白質(zhì)亞群,表明外泌體發(fā)育過程中存在分選機(jī)制。轉(zhuǎn)運(yùn)所需的內(nèi)體分選復(fù)合物(ESCRT)被普遍 認(rèn)為是調(diào)控和引導(dǎo)特定分子進(jìn)入MVBs腔內(nèi)囊泡的途徑。ESCRT,其4個(gè)主要復(fù)合物(ESCRT0,I,II,和III)負(fù)責(zé)傳遞用于溶酶體降解...
外泌分離后可以做蛋白,也可以做RNA(microRNA和LncRNA),36%的研究人員通過Westernblot或其他方法來鑒定蛋白,29%的人員利用qPCR對(duì)microRNA表達(dá)譜進(jìn)行分析,9%利用芯片進(jìn)行microRNA表達(dá)譜分析。同時(shí),新一代測(cè)序的用戶...
外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以**...
外泌體在國家自然科學(xué)基金立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是**學(xué) ,近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在**的形成,耐藥性,檢測(cè)等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在Molecular Cancer (IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/...
外泌體Exosome是由活細(xì)胞分泌的,它是一種亞細(xì)胞成分,組要成分是磷脂雙分子和攜帶的膜性分子,其界定依據(jù)形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)及提取方式不同細(xì)胞源的exosome是不同的,這些不同的理化性質(zhì)有利于exosome的提取。從體外培養(yǎng)的細(xì)胞中分離和提取exosome的主...
外泌體是細(xì)胞的外膜囊泡,是細(xì)胞外納米級(jí)膜囊泡的一個(gè)子集,直徑為30 - 150nm。根據(jù)其釋放機(jī)制和大小,EVs分為以下三種類型:外泌體(直徑小于150 nm)、MVs/脫落顆粒(100~1000 nm)和凋亡小體(500~4000 nm)。人體中幾乎所有類型...
外泌體提取之后利用電鏡來分析其大小和形態(tài),利用流式細(xì)胞儀來分析細(xì)胞表面標(biāo)記,通過Western blot和ELISA等方法對(duì)蛋白進(jìn)行分析,或通過qPCR和新一代測(cè)序(NGS)來分析RNA。調(diào)查發(fā)現(xiàn),在分離exosome時(shí),約有56%的人采用超速離心法,說明這種...
外泌體在**、神經(jīng)退行性疾病、肝臟和腎臟疾病以及多種心肺疾病的預(yù)后和診斷中發(fā)揮著重要作用,比較近的研究表明,外泌體也是一種新型的***試劑。來自間充質(zhì)干細(xì)胞的外泌體已在各種疾病模型中進(jìn)行了測(cè)試,如呼吸系統(tǒng)、心血管、神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉骨骼、肝臟、胃腸道、皮膚和腎臟疾...
外泌體是包含了復(fù)雜RNA展的總外泌體分離試劑從細(xì)胞培養(yǎng)基或任何體液中即刻分離完整的外泌體。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗(yàn)的理想選擇,包括處理少量樣本和處理多個(gè)樣本。從細(xì)胞培養(yǎng)物中富集的總外泌體(使用“總外泌體分離”試劑或超速離心)可以通過免疫磁珠捕獲進(jìn)一步純...
外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的...
外泌分離后可以做蛋白,也可以做RNA(microRNA和LncRNA),36%的研究人員通過Westernblot或其他方法來鑒定蛋白,29%的人員利用qPCR對(duì)microRNA表達(dá)譜進(jìn)行分析,9%利用芯片進(jìn)行microRNA表達(dá)譜分析。同時(shí),新一代測(cè)序的用戶...
外泌存在于人類的生殖,妊娠和胚胎發(fā)育需要精細(xì)/動(dòng)態(tài)的細(xì)胞間通信。**、羊水、血液和母乳都含有具有假定功能的外泌體。精漿外泌體與精子成熟有關(guān)。分子譜顯示,microRNAslet-7a,let-7b,miR-148a,miR-375和miR-99a富集于來自多個(gè)...
外泌體中發(fā)現(xiàn)了一種特定的內(nèi)泌體蛋白質(zhì)亞群,表明外泌體發(fā)育過程中存在分選機(jī)制。轉(zhuǎn)運(yùn)所需的內(nèi)體分選復(fù)合物(ESCRT)被普遍 認(rèn)為是調(diào)控和引導(dǎo)特定分子進(jìn)入MVBs腔內(nèi)囊泡的途徑。ESCRT,其4個(gè)主要復(fù)合物(ESCRT0,I,II,和III)負(fù)責(zé)傳遞用于溶酶體降解...
外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而***靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與...
外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以**...
外泌體的產(chǎn)生過程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),比較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體比較早見于1981年,EGTra...
外泌體的主要功能被認(rèn)為是細(xì)胞之間的信息傳遞,了解它帶有的蛋白質(zhì)和多種RNA上的信息就變得尤其重要。2019年外泌體中標(biāo)項(xiàng)目中帶有熱門話題miRNA、lncRNA和環(huán)狀RNA的項(xiàng)目數(shù)量,我們可以看到,外泌體中的miRNA和lncRNA過去研究的是比較多了,例如發(fā)...
外泌體的臨床應(yīng)用:1.在疾病診斷中的應(yīng)用潛能:外泌體存在于所有的生物體液中,并由所有細(xì)胞分泌,這使得外泌體在液體活檢中具有吸引力,可用于縱向取樣跟蹤疾病進(jìn)展。外泌體的生物發(fā)生可以捕獲復(fù)雜的細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)分子,可用于***的、多參數(shù)的診斷檢測(cè)。外泌體的表面蛋白也...
外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的...