無(wú)血清細(xì)胞凍存液:產(chǎn)品介紹:無(wú)血清細(xì)胞凍存液是一款針對(duì)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細(xì)胞凍存液。該凍存液采用獨(dú)特的凍存配方,包括DMSO在內(nèi)的凍存保護(hù)劑復(fù)合物,**降低了細(xì)胞在凍存過(guò)程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,***提高了細(xì)胞的活力和復(fù)蘇率。無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無(wú)任何動(dòng)物源組分,可維持干細(xì)胞低分化狀態(tài),并且可減少各類***和支原體污染的風(fēng)險(xiǎn),確保細(xì)胞凍存安全。與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液相比,本產(chǎn)品重懸細(xì)胞后可直接凍存于-80℃,無(wú)需程序降溫。無(wú)血清細(xì)胞凍存液:為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。廈門正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷...
細(xì)胞凍存時(shí)間和操作步驟:1、首先我們需要凍存培養(yǎng)液,通常細(xì)胞凍存液含10%的DMSO,或者是甘油、10-20%的小牛血清;、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,并且還需要用PBS進(jìn)行清洗,需要注意在這里要丟棄掉舊的細(xì)胞凍存液;3.去除PBS,加入適量的胰蛋白酶,以覆蓋住培養(yǎng)皿表面為宜,然后把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化掉;然后離心1000rpm5min時(shí)間;4、去除胰蛋白酶,加入凍存培養(yǎng)液,輕輕吹打使細(xì)胞的分布變得均勻,調(diào)節(jié)細(xì)胞較終的密度為5×106/ml-1×107/ml,需要注意這是較佳的細(xì)胞密度;5、將細(xì)胞裝入凍存管之中,每管的含量應(yīng)該保持在1~1.5ml之間。在凍存管上標(biāo)明細(xì)名稱、時(shí)間、操作者;6、較后要說(shuō)的就是...
細(xì)胞凍存:取出凍存管,注明細(xì)胞名稱,代數(shù),日期。離心后,以無(wú)菌吸管吸棄上清,不要吸到底部的細(xì)胞沉淀。將細(xì)胞沉淀與凍存液充分混勻,根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果,將細(xì)胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細(xì)胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細(xì)胞凍存懸液分裝進(jìn)細(xì)胞凍存管中,一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴(yán)密封口后,使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1℃。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中,然后將凍存盒置于–80℃條件下過(guò)夜。若無(wú)凍存盒及其他凍存裝置,可以先將凍存管置于4℃30min,再-20℃凍存1h直至完全冷凍,再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過(guò)夜。第二天將已經(jīng)冷凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮容器中,置于...
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1、細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題:教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。2、復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過(guò)多,細(xì)胞濃度過(guò)低,不利于細(xì)胞的貼壁。3、加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來(lái)看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響,還有一個(gè)說(shuō)法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)...
無(wú)血清細(xì)胞凍存液:解凍解凍后,應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。上述凍存的一管細(xì)胞可以成功的鋪板到6孔板的1-2孔。1.開(kāi)始之前,提前準(zhǔn)備好以下材料:試管,恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基,預(yù)先包被的培養(yǎng)板,確保整個(gè)解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意:不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。2.在37°C水浴中快速解凍,持續(xù)溫和的在水中晃動(dòng)凍存管,直到剩余少量細(xì)胞還處于凍存狀態(tài)。3.水浴中取出凍存管,用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4.用2mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個(gè)15mL的錐形試管。注意:用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解。無(wú)血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件:儲(chǔ)存于4℃以下,質(zhì)量保...
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇實(shí)驗(yàn):一般來(lái)說(shuō),細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)移和保存,較佳的策略是進(jìn)行低溫保存(-70℃~-196℃),而細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均已停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故而可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程,在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。經(jīng)過(guò)前人的長(zhǎng)期試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇基本原則是慢凍速融,這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)...
如何提高細(xì)胞凍存成功率:無(wú)菌!無(wú)菌!無(wú)菌!要折騰嬌貴的細(xì)胞寶寶,必須要在無(wú)菌超凈環(huán)境下才行。超凈工作臺(tái),所有的儀器用品提前滅菌,培養(yǎng)箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對(duì)細(xì)胞的影響經(jīng)常是開(kāi)始的時(shí)候沒(méi)發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)的時(shí)候已經(jīng)結(jié)束了,所以千萬(wàn)要小心。除了操作中的各種小細(xì)節(jié),還有一個(gè)實(shí)驗(yàn)雷區(qū),就是配制細(xì)胞凍存液。常見(jiàn)的凍存液配制要遵循培養(yǎng)基+血清+DMSO的成分要求,根據(jù)細(xì)胞實(shí)際判斷成分配比,還建議使用程控儀,注意配制溫度,一個(gè)不小心就又會(huì)影響細(xì)胞的存活效果。無(wú)血清凍存液用途:為確保產(chǎn)品質(zhì)量,請(qǐng)避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。唐山正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液細(xì)胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生...
細(xì)胞凍存步驟說(shuō)明:配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái);離心1000rpm,5min;去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可...
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中,及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過(guò)程中,雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是必不可少的...
凍存溫度:凍存溫度是指能長(zhǎng)期保存細(xì)胞的較低溫度,在此溫度下,細(xì)胞生化反應(yīng)極其緩慢甚至停止,但經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期保存,在復(fù)蘇后仍能保持正常的結(jié)構(gòu)和功能。不同的細(xì)胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果,冷凍保存溫度可以不同。但從實(shí)際和效益的觀點(diǎn)出發(fā),液氮溫度-196℃是目前較佳的冷凍保存溫度。在-196℃時(shí),細(xì)胞的生命活動(dòng)幾乎完全停止,但復(fù)蘇后細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能完好。如果冷凍過(guò)程得當(dāng),一般生物樣品在-196℃下均可保存十年以上。應(yīng)用-70℃~-80℃保存細(xì)胞,短期內(nèi)對(duì)細(xì)胞的活性無(wú)明顯影響,但隨著凍存時(shí)間延長(zhǎng),細(xì)胞存活率明顯降低。在冰點(diǎn)到-40℃范圍內(nèi)保存細(xì)胞的效果不佳。一些保護(hù)劑,易于穿...
無(wú)血清細(xì)胞凍存液:解凍解凍后,應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。上述凍存的一管細(xì)胞可以成功的鋪板到6孔板的1-2孔。1.開(kāi)始之前,提前準(zhǔn)備好以下材料:試管,恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基,預(yù)先包被的培養(yǎng)板,確保整個(gè)解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意:不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。2.在37°C水浴中快速解凍,持續(xù)溫和的在水中晃動(dòng)凍存管,直到剩余少量細(xì)胞還處于凍存狀態(tài)。3.水浴中取出凍存管,用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4.用2mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個(gè)15mL的錐形試管。注意:用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解。無(wú)血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件:為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能...
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液保存條件:儲(chǔ)存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期2年。3個(gè)月以上沒(méi)有使用凍存液計(jì)劃時(shí),盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液細(xì)胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1、按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2、按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。3、取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離...
胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無(wú)血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細(xì)胞混合液的凍...
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1、凍存液比例一般是培養(yǎng)基:血清:DMSO=7:2:1或5:4:1;動(dòng)物種屬的原代細(xì)胞凍存液可采用的比例是培養(yǎng)基:血清:DMSO=0:9:1,即直接用血清重懸細(xì)胞再加入DMSO,盡管如此,原代細(xì)胞的復(fù)蘇成活率還是很低。2、有文獻(xiàn)表明,細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙,因?yàn)檫@一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。我們實(shí)際操作不可能將速度控制的這么精確,目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min、-80℃2h后轉(zhuǎn)入液氮中。無(wú)血清凍存液使用方法:將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。廣州正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家推薦無(wú)血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。...
密度過(guò)高會(huì)讓細(xì)胞沒(méi)有足夠的生存空間,密度過(guò)低會(huì)讓細(xì)胞無(wú)法互相連接健康生長(zhǎng)。建議大家在細(xì)胞接種前,一定要調(diào)整好適合細(xì)胞生長(zhǎng)的濃度,提高細(xì)胞的存活率。溫度控制不達(dá)標(biāo)慢凍快融是細(xì)胞凍存復(fù)蘇的關(guān)鍵詞之一。常規(guī)的凍存操作中,都會(huì)要求嚴(yán)格的梯度降溫,常見(jiàn)的是-4℃→-20℃至-40℃→-80℃→液氮,一定要避免溫度原因?qū)е录?xì)胞自??;除非使用了成分經(jīng)過(guò)優(yōu)化、經(jīng)過(guò)嚴(yán)格測(cè)試的凍存液,才能免去程序降溫這個(gè)繁瑣的步驟。保存的時(shí)候也要保證整個(gè)細(xì)胞都是處于液氮的液面下方,避免溫度對(duì)細(xì)胞存活的影響。無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液:減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全。廈門正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液銷售廠家細(xì)胞凍存,我們應(yīng)...
細(xì)胞凍存液的操作步驟:1.配置含10%DMSO或凡士林、10~20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的體細(xì)胞,除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液,用PBS清理。3.除去PBS,添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長(zhǎng)發(fā)育的體細(xì)胞消化吸收出來(lái);4.抽濾1000rpm,5min;5.除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液,用塑料吸管輕輕地吹打使體細(xì)胞勻稱,記數(shù),調(diào)整凍存液中體細(xì)胞的較后相對(duì)密度為5牙周106/ml~1牙周107/ml;6.將體細(xì)胞分裝進(jìn)凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)出體細(xì)胞的名字,凍存時(shí)間及作業(yè)者;8.凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1~-2℃/min;當(dāng)溫度...
細(xì)胞凍存液的原理及配制方法:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。無(wú)血清凍存液使用方法:將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。重慶正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1、有文獻(xiàn)表明,細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙,因...
無(wú)血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng):無(wú)血清細(xì)胞凍存液:含多種保護(hù)劑成分,一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,我公司無(wú)血清細(xì)胞凍存液,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率?!井a(chǎn)品用途】1.用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。2.細(xì)胞保藏中心,用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存。3.科研高校,細(xì)胞株凍存。4.醫(yī)院樣本庫(kù)細(xì)胞樣本保存?!臼褂梅椒ā?、細(xì)胞凍存前準(zhǔn)備(1)要求凍存的細(xì)胞在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,且活率大于90%。(2)計(jì)算細(xì)胞密度,一...
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動(dòng)物來(lái)源的血清成分,能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。無(wú)血清凍存液使用方法:1、收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞,離心去除上清培養(yǎng)液。2、加入適量的細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲(chǔ)存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存...
細(xì)胞凍存時(shí)間和操作步驟:1、首先我們需要凍存培養(yǎng)液,通常細(xì)胞凍存液含10%的DMSO,或者是甘油、10-20%的小牛血清;、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,并且還需要用PBS進(jìn)行清洗,需要注意在這里要丟棄掉舊的細(xì)胞凍存液;3.去除PBS,加入適量的胰蛋白酶,以覆蓋住培養(yǎng)皿表面為宜,然后把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化掉;然后離心1000rpm5min時(shí)間;4、去除胰蛋白酶,加入凍存培養(yǎng)液,輕輕吹打使細(xì)胞的分布變得均勻,調(diào)節(jié)細(xì)胞較終的密度為5×106/ml-1×107/ml,需要注意這是較佳的細(xì)胞密度;5、將細(xì)胞裝入凍存管之中,每管的含量應(yīng)該保持在1~1.5ml之間。在凍存管上標(biāo)明細(xì)名稱、時(shí)間、操作者;6、較后要說(shuō)的就是...
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇實(shí)驗(yàn):一般來(lái)說(shuō),細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)移和保存,較佳的策略是進(jìn)行低溫保存(-70℃~-196℃),而細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均已停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故而可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程,在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。經(jīng)過(guò)前人的長(zhǎng)期試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇基本原則是慢凍速融,這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)...
細(xì)胞凍存:取出凍存管,注明細(xì)胞名稱,代數(shù),日期。離心后,以無(wú)菌吸管吸棄上清,不要吸到底部的細(xì)胞沉淀。將細(xì)胞沉淀與凍存液充分混勻,根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果,將細(xì)胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細(xì)胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細(xì)胞凍存懸液分裝進(jìn)細(xì)胞凍存管中,一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴(yán)密封口后,使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1℃?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中,然后將凍存盒置于–80℃條件下過(guò)夜。若無(wú)凍存盒及其他凍存裝置,可以先將凍存管置于4℃30min,再-20℃凍存1h直至完全冷凍,再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過(guò)夜。第二天將已經(jīng)冷凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮容器中,置于...
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致炸列。2.凍存液的問(wèn)題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO)對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:為了避免反復(fù)凍融,傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液,分裝成小管后置于-20℃...
無(wú)血清細(xì)胞凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),大部分的干細(xì)胞,凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存。不含動(dòng)物源性蛋白,不含血清成分,可有效減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):1、無(wú)需程序性降溫,可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存,凍存液無(wú)需稀釋。2、細(xì)胞可于-80℃長(zhǎng)期保存。3、凍存液不含血清等,較大降低細(xì)胞污染的可能性。保存方法:冰袋運(yùn)輸,4℃保存,保質(zhì)期一年。無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法:緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。無(wú)錫正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液哪家便宜無(wú)...
凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(xiǎn)(冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注:DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí),應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。建議可使用廠商生產(chǎn)的無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使用方便,復(fù)蘇率高。注意冷凍保護(hù)劑DMSO的品質(zhì):DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無(wú)菌且無(wú)色,以5-10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍將分裝好的細(xì)胞凍存管,直接置于-80 度冰箱過(guò)夜保存。深圳正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家細(xì)胞凍存經(jīng)驗(yàn)談:選對(duì)凍存培養(yǎng)基才是王道:研究人員經(jīng)常需要冷凍細(xì)胞并保存,以供后續(xù)實(shí)...
細(xì)胞凍存:取出凍存管,注明細(xì)胞名稱,代數(shù),日期。離心后,以無(wú)菌吸管吸棄上清,不要吸到底部的細(xì)胞沉淀。將細(xì)胞沉淀與凍存液充分混勻,根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果,將細(xì)胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細(xì)胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細(xì)胞凍存懸液分裝進(jìn)細(xì)胞凍存管中,一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴(yán)密封口后,使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1℃?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中,然后將凍存盒置于–80℃條件下過(guò)夜。若無(wú)凍存盒及其他凍存裝置,可以先將凍存管置于4℃30min,再-20℃凍存1h直至完全冷凍,再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過(guò)夜。第二天將已經(jīng)冷凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮容器中,置于...
要折騰嬌貴的細(xì)胞寶寶,必須要在無(wú)菌超凈環(huán)境下才行。超凈工作臺(tái),所有的儀器用品提前滅菌,培養(yǎng)箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對(duì)細(xì)胞的影響經(jīng)常是開(kāi)始的時(shí)候沒(méi)發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)的時(shí)候已經(jīng)結(jié)束了,所以千萬(wàn)要小心。除了操作中的各種小細(xì)節(jié),還有一個(gè)實(shí)驗(yàn)雷區(qū),就是配制細(xì)胞凍存液。常見(jiàn)的凍存液配制要遵循培養(yǎng)基+血清+DMSO的成分要求,根據(jù)細(xì)胞實(shí)際判斷成分配比,還建議使用程控儀,注意配制溫度,一個(gè)不小心就又會(huì)影響細(xì)胞的存活效果。學(xué)霸君給各位養(yǎng)細(xì)胞的科研汪們帶來(lái)一款細(xì)胞神器——WakoBAMBANKER?即用型無(wú)血清細(xì)胞凍存液。加入適量細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為1x106~1x107 cells/mL。無(wú)血...
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色:高安全性,完全使用醫(yī)藥品等級(jí)原料進(jìn)行生產(chǎn),不含動(dòng)物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。細(xì)胞存活率高,無(wú)批次差異。完全凍存液配方,可直接使用,方便簡(jiǎn)捷,可直接存放于-70℃冰箱凍存,無(wú)需經(jīng)過(guò)費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程(省時(shí)、省力、省錢)。即用型產(chǎn)品,4℃可穩(wěn)定保存。金華深圳無(wú)血清細(xì)胞凍存液無(wú)血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液...
細(xì)胞凍存經(jīng)驗(yàn)談:選對(duì)凍存培養(yǎng)基才是王道:研究人員經(jīng)常需要冷凍細(xì)胞并保存,以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)或臨床使用?;具^(guò)程相當(dāng)簡(jiǎn)單:慢慢冷凍細(xì)胞,將凍存管放入液氮中,并在需要時(shí)快速解凍。凍存培養(yǎng)基能支持細(xì)胞并防止冰晶形成。不過(guò),Malfavon的體驗(yàn)告訴我們,使用不同的凍存培養(yǎng)基,結(jié)果那可是大不同。一些經(jīng)驗(yàn)老道的研究人員自己制備凍存培養(yǎng)基。不過(guò),那些面對(duì)脆弱細(xì)胞(比如原代和多能細(xì)胞)的研究人員,則更喜歡購(gòu)買標(biāo)準(zhǔn)化的商業(yè)產(chǎn)品。一些非常敏感的細(xì)胞系也許能從添加物中受益,以避免細(xì)胞在解凍時(shí)凋亡。將分裝好的細(xì)胞凍存管,直接置于-80 度冰箱過(guò)夜保存。杭州無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)...
無(wú)血清凍存液使用方法:1、收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞,離心去除上清培養(yǎng)液。2、加入適量的細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲(chǔ)存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。無(wú)血清凍存液注意事項(xiàng):1、請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2、凍存液加入細(xì)胞后,請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長(zhǎng)期凍存細(xì)胞,請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞...