實驗注意事項:建議先做幾個孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時,建議斜貼著培養(yǎng)板壁加,不要插到培養(yǎng)基頁面下加,容易產(chǎn)生氣泡,會干擾OD值讀數(shù)。白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較...
Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8(化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),適用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。 實驗原理:...
實驗室設(shè)備數(shù)量有限:食品在生產(chǎn)、儲存、運輸及銷售等各個環(huán)節(jié),都有可能受到污染,需要多部門、多環(huán)節(jié)來加以監(jiān)控。而實驗室的建設(shè)成本較大、設(shè)備數(shù)量有限,滿足不了實際需求,由此需要便攜式的快速檢測設(shè)備、試材來實施快速檢測行為。實驗室的樣品檢測周期較長:對于許多食物...
自然殺傷(NK)細(xì)胞在識別和殺死**和病毒感ran的先天和后天免疫反應(yīng)中扮演著關(guān)鍵的角色。因此,已有許多研究嘗試研發(fā)在體外激huo和擴(kuò)增NK細(xì)胞的方法,以用于和免疫細(xì)胞相關(guān)研究,而目前的方法包括使用細(xì)胞因子、化學(xué)試劑以及飼養(yǎng)細(xì)胞1,其中細(xì)胞因子在調(diào)節(jié)N...
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是 ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等;ELISA試劑盒適用于體外定性檢...
隨著新技術(shù)、新項目的快速發(fā)展,與之相匹配的生化試劑盒也進(jìn)入臨床實驗室。那么在開展新實驗之前,面對多種試劑盒,我們該如何選擇合格有效、適合本實驗室的試劑盒呢?通常生化試劑盒可分為液體單試劑和液體雙試劑,前者特別適用于半自動生化分析儀和小型自動生化分析儀,使用...
JC-1是一種陽離子染料,可以在線粒體內(nèi)聚集,低濃度時主要以單體存在,發(fā)射光以綠光為主;而在高濃度時則可以形成多聚體,發(fā)射光以紅光為主。線粒體本身存在一定的極性,其外膜為負(fù)極,內(nèi)膜為正極。電位差由鈣離子、鈉離子和氫離子流調(diào)控。當(dāng)線粒體狀態(tài)良好時對JC-1攝...
來源于生物體內(nèi)的熒光素,常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶。這些熒光素酶作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,這種技術(shù)被稱為報告基因檢測法或螢光素酶檢測法(LuciferaseAssay)。跟普通融合蛋白標(biāo)簽不同,使用熒光素酶構(gòu)建的...
常用的病毒載體有腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體只能感ran分裂期細(xì)胞,而且容量有限,腺病毒一般不能整合到染色體上,只能進(jìn)行瞬時感ran。與其它逆轉(zhuǎn)錄病毒相比,慢病毒(LV)具有可以感ran非分裂期細(xì)胞、容納外源性基因片段大,可以長期表達(dá)等xian ...
細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中相對基礎(chǔ)的實驗,做好細(xì)胞培養(yǎng)是實驗邁向成功的第一步。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,保持無菌操作流程,維持無菌的工作區(qū)域,選擇合適的培養(yǎng)基以及提供適宜的培養(yǎng)環(huán)境有助于細(xì)胞增殖。同時,監(jiān)測新培養(yǎng)的細(xì)胞狀態(tài)也是必不可少的環(huán)節(jié)。使用高壓滅菌器或無菌過濾...
首先,酶標(biāo)儀使用前務(wù)必預(yù)熱10-15min,使測讀結(jié)果更穩(wěn)定。其次,ELISA實驗采用雙波長測定吸光度,可以排除單波長檢測時的測定干擾(標(biāo)本的濃度,干擾色等)。一般采用長作為參照波長,在參照波長下,檢測物的吸光值小,檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非...
細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。在培養(yǎng)細(xì)胞的實驗中有有幾種試劑是經(jīng)常用到的。為大家分享:細(xì)胞培養(yǎng)常用的幾種試劑。下面我們來瞧瞧吧!高糖DMEM溶液 用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(規(guī)格10×1L),溶入約總量的1/3的...
檢測試劑盒你簡單理解就是一盒可以機(jī)械操作的定性檢測的東西,你要有帶檢測指標(biāo)(比如這次的rna,比如一些蛋白)然后有檢測它可視化的東西(比如對應(yīng)的標(biāo)記的抗體,顯色劑什么的)。做成可以流水線操作的試劑盒。(其中為了可操作性可能會有別的添加成分,比如變性試劑,比...
還有前幾天菲律賓衛(wèi)生部官員有關(guān)中國援菲檢測試劑準(zhǔn)確度的表態(tài),菲律賓衛(wèi)生部日前也已做出澄清,指出中國捐贈的檢測試劑盒與世衛(wèi)組織提供的檢測試劑效果一致,質(zhì)量非常好,為菲律賓快速應(yīng)對發(fā)揮了重要作用。菲律賓衛(wèi)生部還對此前有關(guān)言論引發(fā)的誤解表示歉意。大家可能注意到,...
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)是一種快速檢測臨床和實驗樣品中蛋白質(zhì)含量的方法,根據(jù)研究需求,有許多方式可供選擇,如直接ELISA,間接ELISA,競爭性ELISA和夾心ELISA等。ELISA是生物學(xué)實驗常用的一種技術(shù),其具有快速、易于操作等優(yōu)點,但當(dāng)條件不...
GST(谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶)標(biāo)簽蛋白本身是一個在解du過程中起到重要作用的轉(zhuǎn)移酶,它的天然大小為26KD。將它應(yīng)用在原核表達(dá)的原因大致有兩個,一個是因為它是一個高度可溶的蛋白,希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性;另一個是它可以在大腸桿菌中大量表達(dá),起到提高...
腺病毒與其他病毒工具比較,具有以下優(yōu)勢:a.是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng):腺病毒感ran細(xì)胞后,1-2天即可表達(dá),是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng);b.滴度高:腺病毒系統(tǒng)在轉(zhuǎn)有E1基因的HEK293細(xì)胞中可進(jìn)行自我復(fù)制,可產(chǎn)生滴度為...
溶液3的主要作用是中和第二步加入的強堿以及清掉蛋白質(zhì)等細(xì)胞內(nèi)的雜質(zhì)。N是neutralized的縮寫。強堿溶液氫氧化鈉長時間與DNA基礎(chǔ)會破壞其結(jié)構(gòu),因此需要進(jìn)行中和。中和氫氧化鈉,5 M醋酸就足夠了,為何又要加入醋酸鉀呢?做過質(zhì)粒提取實驗的同學(xué)應(yīng)該記得,...
來自蛋白質(zhì)的生物熒光,如綠色熒光蛋白(GFP)可能已經(jīng)在水母等生物中存在了數(shù)百萬年。直到20世紀(jì)60年代,科學(xué)家才開始真正研究綠色熒光蛋白,并推斷出它的生化特性?,F(xiàn)在,GFP及其熒光衍生物已成為實驗室的主要研究對象。GFP被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)科的研究,包括:...
競爭法也是一種很常用的方法,一起看看: 競爭法(Competitive ELISA)是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標(biāo)抗體/抗原競爭性結(jié)合的分析方法。當(dāng)游離抗體(或抗原)濃度越高,則能與固定抗原(或抗體)結(jié)合的酶標(biāo)抗體(或抗原)就越少,后續(xù)顯色就...
包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,對于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上,再通過特異性反應(yīng)使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小...
首先,酶標(biāo)儀使用前務(wù)必預(yù)熱10-15min,使測讀結(jié)果更穩(wěn)定。其次,ELISA實驗采用雙波長測定吸光度,可以排除單波長檢測時的測定干擾(標(biāo)本的濃度,干擾色等)。一般采用長作為參照波長,在參照波長下,檢測物的吸光值小,檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非...
小編在反復(fù)的研究中發(fā)現(xiàn),很多相關(guān)elisa試劑盒的說明以及操作步驟和注意事項都是網(wǎng)上重復(fù)的專業(yè)性說明書,所以在這樣的情況下,想要去編輯一篇新的文章,可以說是無從下手了,因為缺乏相關(guān)知識,但是切勿急躁,后續(xù)我們將探討如何對于無從下手的產(chǎn)品知識進(jìn)行編輯的思路。...
測定試劑空白吸光度變化(ΔA/min),用來檢查試劑在工作狀態(tài)下的穩(wěn)定性。但事實上,試劑空白吸光度變化速率無法反映試劑盒的穩(wěn)定性,試劑空白吸光度變化速率主要反映干擾程度和儀器的穩(wěn)定性。用吸光度差值(ΔA)或吸光度變化(ΔA/min)來表示單位濃度的被測物反...
傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在模擬細(xì)胞體內(nèi)生存環(huán)境方面做得還不夠。3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)明就是為了在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,為細(xì)胞提供一個更加接近體內(nèi)生存條件的微環(huán)境。3D細(xì)胞培養(yǎng)是能在細(xì)胞培養(yǎng)過程中為細(xì)胞提供一個更加接近體內(nèi)生存條件的微環(huán)境的培養(yǎng)技術(shù)。利用磁性微球載體和磁懸浮...
以去除大的顆粒物質(zhì),之后再用0.22μm濾膜收集微生物,這時會遇到一個問題,就是去除的顆粒物質(zhì)也會吸附一部分微生物,因此造成了收集的微生物樣品不完整,本人之前的一篇文章就被審稿問了這個問題,所以在進(jìn)行樣品處理的時候,一定要首先明確要研究的是被顆粒物吸附的微...
在酶聯(lián)免疫實驗操作中,加樣是必不可少的項步驟,這步驟在整個實驗中都有著很大的影響。那么酶聯(lián)免疫加樣步驟問題應(yīng)如何解決處理呢? 一、加樣問題的可能原因 1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱...
3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)能夠更好地模擬生物體內(nèi)細(xì)胞存活的自然環(huán)境,其自然條件可保持細(xì)胞間相互作用和更逼真的生化和生理反應(yīng)。在3D環(huán)境中,細(xì)胞對內(nèi)源性和外源性刺激(如溫度、pH、營養(yǎng)吸收、轉(zhuǎn)運和分化等方面的改變)應(yīng)答更接近于它們在體內(nèi)的反應(yīng)。再生醫(yī)學(xué)的力量為理解發(fā)育...
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世...
細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中相對基礎(chǔ)的實驗,做好細(xì)胞培養(yǎng)是實驗邁向成功的第一步。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,保持無菌操作流程,維持無菌的工作區(qū)域,選擇合適的培養(yǎng)基以及提供適宜的培養(yǎng)環(huán)境有助于細(xì)胞增殖。同時,監(jiān)測新培養(yǎng)的細(xì)胞狀態(tài)也是必不可少的環(huán)節(jié)。使用高壓滅菌器或無菌過濾...