紡錘體觀測儀使ICSI更加安全可靠在進行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時,**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細胞時,通常認為,卵母細胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉動卵母細胞使其***極**于6點或12點處,然后在3點處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測儀后發(fā)現(xiàn),***極體并不能很好地預測紡錘體的位置。一項研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動,或者紡錘體在胞質中的易位都使兩者的位置關系發(fā)生改變,普通光學顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測儀,可以精確地對卵母細胞中紡錘體的位置進行定位,從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻報道,在進行ICSI時,觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細胞的受精率和質量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學者發(fā)現(xiàn),有些卵母細胞在普通光學顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測儀這個“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。紡錘體在細胞分裂過程中與細胞骨架協(xié)同工作。武漢紡錘體卵冷凍研究
紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在有絲分裂前期,中心體被復制形成兩個中心體,并逐漸分離,形成兩個紡錘體。紡錘體的微管從中心體發(fā)出,與染色體上的著絲粒(kinetochore)結合。著絲粒是一組復雜的蛋白質結構,可以與微管的末端結合。當纖維束的微管末端與著絲粒結合時,纖維束開始縮短,將染色體拉向兩端,實現(xiàn)染色體的精確分離。這一過程不僅確保了每個新細胞都能獲得正確數(shù)量的染色體,還保證了遺傳信息的穩(wěn)定傳遞。美國非侵入式成像紡錘體透明帶紡錘體的形成和功能與細胞的周期調控密切相關。
什么是紡錘體?它有多重要?紡錘體主要由微管蛋白組成,微管蛋白是一種含有α和β亞單位的異二聚體。紡錘體不是一成不變的,常常處于組裝和去組裝的動態(tài)變化過程中,一般在細胞分裂的中、后期,紡錘體結構較為典型。紡錘體主要有兩個作用:其一,排列與分配染色體;其二,決定細胞胞質分裂的分裂面。紡錘體的完整性決定了染色體分裂過程在時間和空間上的準確性。紡錘體就像一位聰明的大力士的雙手,在細胞分裂過程中,能精細的將等位染色體平均拉向細胞的兩極,確保分裂后的2個子細胞中的染色體數(shù)目相等。但是,如果這個大力士多了一只或幾只手,染色體的分配將紊亂,導致非整倍體。紡錘體損傷的增加多見于高齡婦女,或接觸某些化學物質的卵母細胞。在細胞分裂過程中,紡錘體對卵母細胞染色體的平衡、運動、分配、和極體的排出非常關鍵。卵母細胞成熟過程中的兩次減數(shù)分裂形成兩次紡錘體,卵母細胞受精、雌雄原核融合后又會形成有絲分裂紡錘體。
亨廷頓病是一種由亨廷頓基因突變引起的神經(jīng)退行性疾病,其主要病理特征是亨廷頓蛋白的異常聚集。研究表明,紡錘體功能障礙在亨廷頓病的發(fā)生和發(fā)展中也起著重要作用。亨廷頓病患者中,亨廷頓蛋白的異常聚集影響微管的穩(wěn)定性和紡錘體的組裝,導致染色體分離異常和細胞周期紊亂。紡錘體功能障礙會導致染色體不穩(wěn)定,增加基因組的不穩(wěn)定性,進而影響神經(jīng)元的正常功能和存活。紡錘體功能障礙會導致細胞周期紊亂,增加細胞凋亡的風險,加速神經(jīng)元的丟失。紡錘體的研究有助于揭示細胞分裂過程中的錯誤修復機制。
冷凍與解凍過程中涉及多個環(huán)節(jié),包括溫度控制、時間控制、冷凍保護劑的添加與去除等。這些環(huán)節(jié)中的任何一步操作不當都可能導致紡錘體損傷。因此,需要不斷優(yōu)化冷凍與解凍技術,以減少對紡錘體的不良影響。近年來,研究者們通過不斷嘗試和優(yōu)化冷凍保護劑的配方,取得了進展。例如,甘油、二甲基亞砜(DMSO)等滲透性保護劑被用于哺乳動物卵母細胞的冷凍保存中,它們能夠迅速降低細胞內(nèi)水分含量,減少冰晶形成。同時,一些非滲透性保護劑如蔗糖、海藻糖等也被發(fā)現(xiàn)對紡錘體具有一定的保護作用。紡錘體在細胞分裂中的精確調控是生物體發(fā)育的基礎。昆明輔助生殖紡錘體廠家
紡錘體的異常會導致細胞分裂錯誤,進而引發(fā)染色體不穩(wěn)定性和遺傳性疾病。武漢紡錘體卵冷凍研究
微管重組技術是體外構建紡錘體模型的基礎。通過在體外重組微管蛋白,可以形成類似于細胞內(nèi)紡錘體的微管結構。常見的方法包括:從牛腦或其他來源中純化微管蛋白,確保其純度和活性。在體外條件下,通過控制溫度、離子濃度等參數(shù),誘導微管蛋白組裝成微管。使用微管穩(wěn)定劑(如紫杉醇)或調節(jié)蛋白(如MAPs)穩(wěn)定微管結構,模擬細胞內(nèi)的微管動態(tài)變化。動力蛋白和調節(jié)蛋白是紡錘體功能的重要組成部分。通過在體外模型中添加這些蛋白,可以模擬紡錘體的動力學行為。常見的方法包括:添加動力蛋白(如dynein、kinesin)以模擬微管的運動和動力學行為。添加調節(jié)蛋白(如AuroraB、Mad2)以模擬紡錘體檢查點的功能。武漢紡錘體卵冷凍研究