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外泌體的產(chǎn)生過(guò)程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),比較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體比較早見(jiàn)于1981年,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為exosome。對(duì)于外泌體的作用,當(dāng)時(shí)推測(cè)為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗**反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過(guò)外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來(lái)越多,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細(xì)胞分化、**生長(zhǎng)于侵襲等各種生物過(guò)程中。外泌體鑒定透射電鏡,英瀚斯生物。安徽靠譜的外泌體多少錢
外泌體中發(fā)現(xiàn)了一種特定的內(nèi)泌體蛋白質(zhì)亞群,表明外泌體發(fā)育過(guò)程中存在分選機(jī)制。轉(zhuǎn)運(yùn)所需的內(nèi)體分選復(fù)合物(ESCRT)被普遍 認(rèn)為是調(diào)控和引導(dǎo)特定分子進(jìn)入MVBs腔內(nèi)囊泡的途徑。ESCRT,其4個(gè)主要復(fù)合物(ESCRT0,I,II,和III)負(fù)責(zé)傳遞用于溶酶體降解和蛋白質(zhì)回收的泛素化蛋白。比較近的研究表明,特異性ESCRT家族蛋白的缺失可以改變外泌體的蛋白質(zhì)含量和細(xì)胞釋放外泌體的速率。更有趣的是,ESCRT系統(tǒng)的組件,如TSG101和Alix,被發(fā)現(xiàn)富集于外泌體,因此被用作外泌體鑒定的標(biāo)記物。上海外泌體南京英瀚斯,外泌體檢測(cè)服務(wù),分離鑒定都能做。
外泌體的主要功能被認(rèn)為是細(xì)胞之間的信息傳遞,了解它帶有的蛋白質(zhì)和多種RNA上的信息就變得尤其重要。2019年外泌體中標(biāo)項(xiàng)目中帶有熱門話題miRNA、lncRNA和環(huán)狀RNA的項(xiàng)目數(shù)量,我們可以看到,外泌體中的miRNA和lncRNA過(guò)去研究的是比較多了,例如發(fā)表在Hepatology(IF=14.971)上的一篇文章表明肝ai細(xì)胞釋放的外泌體miRNA調(diào)控巨噬細(xì)胞程序性死亡配體1的表達(dá)。另一篇文章發(fā)現(xiàn)膽管細(xì)胞來(lái)源的外泌體LncRNA H19促進(jìn)肝星狀細(xì)胞活化和膽汁淤積性肝纖維化。相對(duì)的,外泌體中的circRNA研究目前還較少,而circRNA分子自身獨(dú)特的穩(wěn)定性、組織特異性、時(shí)序和疾病特異性等,使它很有可能成為外泌體檢測(cè)的下一個(gè)熱門分子。
外泌體是胞內(nèi)多泡體與細(xì)胞膜融合后,釋放到細(xì)胞外的膜性小囊泡,是細(xì)胞間信號(hào)傳輸?shù)妮d體。2013年,諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了三位科學(xué)家,表彰其在細(xì)胞間囊泡運(yùn)輸調(diào)控機(jī)制領(lǐng)域作出突出貢獻(xiàn),將外泌體研究的熱度推向高潮。由于在臨床上的巨大應(yīng)用價(jià)值,近幾年外泌體成為科研熱點(diǎn),相關(guān)論文發(fā)表數(shù)量呈式增長(zhǎng),2018年外泌體相關(guān)SCI論文近2500篇,2019年截止到目前,外泌體相關(guān)文獻(xiàn)已將近1000篇。英瀚斯生物,一站式實(shí)驗(yàn)平臺(tái),專業(yè)做外泌體提取檢測(cè)。外泌體研究整體解決方案_英瀚斯生物。
外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不僅只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過(guò)286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。英瀚斯生物專業(yè)做外泌體檢測(cè)、電鏡、粒徑分析。外泌體組學(xué)_外泌體測(cè)序 南京英瀚斯生物。山東靠譜的外泌體價(jià)格
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外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心,這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。四是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。五是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度比較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法比較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體安徽靠譜的外泌體多少錢